技术快讯 || 熙华药业携手沃特世推出新型转染试剂FectoVIR®-AAV 的专属检测方法
发布时间：2022-07-25 03:11:55
FectoVIR®-AAV是一种全化学合成、不含动物源的阳离子型聚合物转染试剂，专为悬浮细胞体系规模化生产而开发。相比于其它同类型的阳离子型转染试剂，FectoVIR®-AAV独特的优势(大幅提高产量、延长转染孵育时间等)使其更适用于工业级的大规模生产。因此，从生产工艺以及产品安全性（阳离子型聚合物转染试剂具有一定的细胞毒性1）的角度出发,需要更为灵敏且成熟的分析方法对其含量情况进行监控。
基于以上目的，上海熙华药业携手沃特世(Waters)开发了适用于基因-细胞治疗产品的FectoVIR®-AAV专属分析方法（如图1所示）。该方法具有重复性好、灵敏度高、线性及准确度优良等特点，可用于各类基因-细胞治疗中间体及成品的检测放行。
图1 FectoVIR® -AAV加标溶液色谱图（图中红色峰为FectoVIR®-AAV）
图2结果显示本方法的重现性和精密度良好。
图2 连续6针加标溶液图谱
如图3所示，可以得知该方法的检测限和定量限分别大致为3ppm和6ppm。
图3 灵敏度溶液（图A和B中FectoVIR®-AAV的浓度分别为30ppm，60ppm）
如图4所示，30~300ppm范围内呈线性相关良好
图4 FectoVIR® -AAV标准曲线
结果如图5所示，在制剂中分别加入不同浓度的FectoVIR®-AAV进行加标回收率实验，回收率在96.2~102.8%之间。
图5 75ppm、150ppm、225ppm三个水平FectoVIR®-AAV的加标回收率
结论
通过上述实验，可知该方法的专属性好、灵敏度高、工作曲线相关性优异，且有着较高的准确度与精密度，可以作为生物药制剂产品中FectoVIR®-AAV含量及残留测定的优选解决方案。
参考文献：
1.NeuM, FischerD, KisselT. Recent advances in rational gene transfer vector design based on poly(ethylene imine) and its derivatives. J Gene Med, 2005;7: 992–1009.
